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上海研域生物人ELISA檢測(cè)試劑盒的操作步驟與方法
發(fā)布時(shí)間： 2025-09-18 點(diǎn)擊次數(shù)： 69次上海研域生物企業(yè)的成長(zhǎng)離不開(kāi)文化，文化是企業(yè)的精神，是企業(yè)的靈魂，更是企業(yè)與員工和客戶攜手共創(chuàng)成功的過(guò)程，我司標(biāo)準(zhǔn)品、產(chǎn)品、培養(yǎng)基、生物試劑、抗體等實(shí)驗(yàn)試劑產(chǎn)品火爆熱銷，歡迎您來(lái)詳詢！
人ELISA檢測(cè)試劑盒的操作方法：
本方法首先將特異性抗體吸附于固相載體表面，我們把抗原和抗體吸附到固相載體表面的這個(gè)過(guò)程，稱為包被，也可叫做致敏。經(jīng)洗滌后分成兩組：一組加酶標(biāo)記抗原和被測(cè)抗原的混合液，而另一組只加酶標(biāo)記抗原，再經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色，這兩組底物降解量之差，即為我們所要測(cè)定的未知抗原的量。
1. 包被抗體：用包被緩沖液稀釋特異性抗體球蛋白至*適濃度（1～10μg/ml），每凹孔加0.3ml，4℃過(guò)夜，或37℃水浴3小時(shí)，貯存冰箱。
2. 洗滌：移去包被液，凹孔用洗滌緩沖液（含0.05%吐溫-20）洗3次，每次5分鐘。
3. 分2組，a組加酶標(biāo)記抗原和被檢抗原Elisa試劑盒混合液0.2ml，b組只加酶標(biāo)記抗原液0.2ml，37℃作用1～2小時(shí)。（混合液可作成不同稀釋度）
4. 洗滌：移去包被液，凹孔用洗滌緩沖液（含0.05%吐溫-20）洗3次，每次5分鐘。
5. 加入0.2 ml底物溶液于每個(gè)凹孔（OPD或OT），室溫作用30分鐘（另作一空白對(duì)照，0.4ml底物加0.1ml終止劑）。
6. 加終止劑：每凹孔加2M H2SO4或2M檸檬酸0.05ml。
7. 用酶標(biāo)比色計(jì)測(cè)定a、b兩組OD值，并求出a、b、OD值的差數(shù)。
人ELISA檢測(cè)試劑盒的注意事項(xiàng)：
1. 干冰是固體二氧化碳，溫度為零下78℃，濕冰就是冰的溫度，一般為冷凍條件的溫度，如在零下20℃冷凍的冰的溫度為零下20℃。對(duì)于一些酶類等蛋白產(chǎn)品，需要干冰運(yùn)輸，其他大多數(shù)生化試劑采用濕冰即可；
2. 運(yùn)輸常溫試劑的時(shí)候，不需要冰。對(duì)于需要冷藏的試劑，在用冰運(yùn)輸?shù)臅r(shí)候，要把試劑同冰之間有隔離物，不能直接接觸試劑包裝，如試劑外面加裝盒子，在盒子外面加冰，基本都采用冰塊，不能直接用水結(jié)成的冰，因?yàn)楸诨髸?huì)形成水，容易污染試劑。加冰塊的量沒(méi)有嚴(yán)格限制，以試劑Elisa試劑盒四周都處于冰塊包圍為宜；
3. 不要小看生物試劑的量，很多抗體類試劑、酶類試劑是很貴的，可以達(dá)到上千元/mg(即每公斤幾百，上千萬(wàn)元），其保存條件也是很嚴(yán)格的，否則容易失去活性。運(yùn)輸?shù)臅r(shí)候建議使用冰塊，而非碎冰，
主要原因：
（1）碎冰的溫度高，而冰塊的溫度更低；（2）冰塊可以更長(zhǎng)時(shí)間的保持低溫；
（3）碎冰容易化成水。
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